Separazioni Chirali 2: Ottimizzazione delle separazioni chirali

Le colonne ciclodestrina sono uniche nella loro capacità di risolvere una varietà di composti chirali. Nel mio ultimo blog ho trattato le singole separazioni delle colonne di diversi composti chirali. Oggi vorrei mostrare come ottimizzare questa separazione. Le variazioni della velocità lineare e della rampa di temperatura possono influenzare notevolmente la risoluzione degli enantiomeri. A seconda del tipo di colonna chirale, la temperatura iniziale del forno GC può influenzare la larghezza del picco. La portata dei campioni di colonna varia con i diversi composti e il sovraccarico provoca un ampio scodamento del picco e una separazione enantiomerica ridotta.

Velocità lineare (flusso della colonna)

Nella nostra analisi abbiamo lavorato con l’idrogeno. La velocità lineare ottimale dell’idrogeno è di circa 40 cm/s. Tuttavia, come mostrato nella Figura 1, si sono ottenute risoluzioni migliori con velocità lineare/flussi superiori (60-80 cm/s).

Figura 1: Fattori di risoluzione in funzione della velocità lineare. Rt-βDEXsa: 40 °C (80 ºC per i lattoni) fino a 200 °C a 2 °C/min. (mantenimento 1 min.). Idrogeno come carrier gas.

Programma di temperatura

La risoluzione chirale può migliorare riducendo la velocità della rampa di temperatura. I migliori programmi di temperatura sono compresi tra 1 e 2 °C/min (Figura 2).

Figura 2: Fattori di risoluzione in funzione della rampa di temperatura. Rt-βDEXsa: 40 °C fino a 200 °C (mantenimento 1 min.). Velocità lineare 80 cm/s. Idrogeno come carrier gas

Per ottimizzare la separazione chirale:

• Velocità lineare maggiore (60-80 cm/sec.) con l’idrogeno come carrier gas.
• Velocità di rampa di temperatura minore (1-2 ºC/min.).
• Temperatura di esercizio minima adeguata (40 o 60 ºC).
• Concentrazioni on-column di 50 ng o inferiore.